换一批多重位点特异性PCR法同时鉴别百部药材的3种基原
Identification of three original sources of Stemonae Radix by multiplex allele-specific PCR
摘要目的 建立一种同时鉴别百部3种基原的多重位点特异性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法.方法 通过分析直立百部、蔓生百部和对叶百部的trn K-rps16基因序列,寻找单核苷酸多态性(SNP)位点并设计特异性鉴别引物,通过优化PCR反应体系,确定最优的多重PCR反应条件,并对该方法的最低检出限和掺伪检出限进行考察.结果 在退火温度为54℃、循环数为33个时,直立百部在349 bp处有一特异性条带,对叶百部在130、266 bp处各有一特异性条带,蔓生百部分别在127、295 bp处各有一特异性条带.该方法对直立百部、对叶百部和蔓生百部的最低检出限分别为0.71、7.67、6.80 ng,在对叶百部中分别掺有直立百部和蔓生百部时,该方法的检出限均为10%.结论 该研究建立了一种可同时准确鉴别直立百部、对叶百部和蔓生百部的多重位点特异性PCR鉴别方法,为百部药材的基原混用问题研究、药材质量和用药安全提供了参考.
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关键词
百部多重位点特异性PCR分子鉴定掺伪Stemonae Radixmultiplex allele-specific PCRmolecular identificationadulteration
栏目名称
DOI
10.16809/j.cnki.2096-3653.2025020802
发布时间
2025-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
工业和信息化部产业技术基础公共服务平台项目（2022-230-221）
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