换一批多重位点特异性PCR同时鉴别九香虫及其混伪品
Simultaneous identification of Aspongopus chinensis Dallas and its adulterants by multiplex allele-specific PCR
摘要目的 建立一种同时鉴别九香虫及其混伪品的多重位点特异性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR).方法 通过分析九香虫Aspongopus chinensis Dallas及其混伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,筛选单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点并设计特异性鉴别引物,优化PCR反应体系,确定最佳多重PCR反应条件,并对该方法的最低检测限和混伪品检出限进行考察.结果 在退火温度为60℃、循环数为31时,九香虫、麻皮蝽、茶翅蝽、短角瓜蝽、大皱蝽分别扩增出301、129、175、117、390 bp的特异性条带.本方法对九香虫、麻皮蝽、茶翅蝽、短角瓜蝽和大皱蝽的最低检测限分别为43.40、3.72、24.50、6.04、8.33 ng,对九香虫中分别掺有麻皮蝽、茶翅蝽、短角瓜蝽、大皱蝽的检出限为3%、1%、1%、5%.结论 该研究建立了一种可同时准确鉴别九香虫、麻皮蝽、茶翅蝽、短角瓜蝽、大皱蝽的多重位点特异性PCR鉴别方法,为九香虫药材的混伪问题研究、以及药材质量和用药安全提供了参考.
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关键词
九香虫多重位点特异性PCR分子鉴定混伪品单核苷酸多态性Aspongopus chinensis DallasMultiplex allele-specific PCRmolecular identificationadulterationsingle nucleotide polymorphisms
分类号
R913.5（药物基础科学）
栏目名称
DOI
10.16809/j.cnki.2096-3653.2025040203
发布时间
2025-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
工业和信息化部产业技术基础公共服务平台项目（2022-230-221）
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