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TB AccuProbe、INNO-LIPATM RIF.TB探针和rpoβ DNA测序三种方法鉴定结核分枝杆菌的研究

Study on identification of mycobatertium tuberculous with TB AccuProbe and INNO-LIPATM RIF.TB and rpo β sequencing

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摘要目的用3种先进的技术-TB AccuProbe DNA杂交法、INNO-LIPATM RIF.TB(uPA)探针试验和rpoβ DNA基因序列测定的前瞻性研究,以鉴定结核分枝杆菌复合物(MTBC)和非结核分枝杆菌(NTM)及其成本效益.方法在Bactec MGIT960培养系统中将获得的105例阳性培养物筛选出70例MTBC和35例NTM,用3种技术鉴定并检测其rpoβ基因序列突变位点.结果TB AccuProbe杂交阳性率是95.7%(67/70),LiPA DNA探针阳性率是98.6%(69/70),rpoβ DNA序列测定阳性率是97.1%(68/70).3种方法两两比较差异在统计学上均无显著意义(P＞0.05).每份阳性培养物花费时间:TB Ac-cuProbe杂交法和LiPA DNA探针法在24小时内完成,全部完成需6～37天,平均为15天;rpoβ基因序列测定需4～5天完成,全部完成需8～40天,平均17天.比传统的4～8周鉴定时间减少了很多.每份标本所需费用3种方法各为120、194和96元.在35例NTM中,3种方法均为MTBC阴性,同时rpoβDNA序列测定鉴定了NTM的种类.结论TB AecuProbe杂交和LiPA DNA探针操作简便,所需时间短,只能鉴定MTBC和NTM.但LiPA DNA探针还能鉴定rpoβ基因位点突变;rpoβ基因序列测定所需时间稍长,要有特定仪器和专门人员,但所需费用较低,除能鉴定MTBC外,还能测定MTB rpo β基因位点突变,同时能鉴定NTM的种类.