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APOBEC3F的克隆、真核表达及其抗HBV效应的初步研究

Cloning and Eukaryotic Expression of APOBEC3F and Its Anti-HBV Effect

摘要目的 克隆、体外真核表达载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)基因并研究其抗病毒效应.方法 应用RT-PCR的方法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3F基因,构建HA-APOBEC3F融合蛋白真核表达载体pXFA3F,pXFA3F和具有复制能力的1.3倍HBV载体pHBV1.3共转染HepG2细胞,Western印迹检测APOBEC3F融合蛋白在HepG2细胞中的表达,ELISA方法检测细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg水平,实时定量PCR检测HBV相关mRNA水平变化.结果 克隆了APOBEC3F基因,其经测序与GeneBank公布序列一致;构建的APOBEC3F真核表达载体pXFA3F经转染可在HepG2细胞中瞬时表达;APOBEC3F可抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌,可使转染细胞内HBV相关mRNA水平下降.结论 成功克隆并真核表达了APOBEC3F基因,其在体外具有抗HBV生物学效应.

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DOI 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.04.008
发布时间 2007-09-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家重点基础研究发展计划(973计划)((2001CB51008;2005CB522901))
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