摘要目的 将人延伸体复合物﹙elongator﹚的中心亚基elp3﹙elongtor complex protein 3﹚基因导入293T细胞,观察它对293T细胞生长特性以及基因转录活性的影响.方法 用脂质体将pFlAGCMV4-Elp3真核表达载体导入293T细胞,通过G418持续筛选阳性克隆,建立elp3的稳定表达细胞株.通过RT-PCR、免疫荧光法检测外源性elp3基因的表达.MTT法测定细胞生长曲线、流式细胞仪法测定细胞周期及凋亡情况.瞬时转染不同组合的质粒后,收集细胞用荧光素酶报告基因法检测转染前后荧光素酶活性的变化.结果 Elp3可以抑制293T细胞生长,并使细胞出现G1期阻滞,未引起293T细胞凋亡.elp3能激活转录,但作用较弱.elp4也可激活转录,过量表达elp3基因与elp4基因时,可明显激活转录,说明两者有协同激活转录作用.Elp3与转录因子TFⅡF亚基RAP30基因过量表达时,两者也可协同激活转录.结论 Elp3对293T细胞的生长有明显抑制作用,可诱导G1期细胞阻滞,具有转录激活功能,并可分别与Elp4亚基、RAP30亚基协同激活转录.
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