换一批miRNA-30b-3p靶向ZNRF1调控草酸钠诱导的HK-2细胞凋亡和氧化应激的研究
miR-30b-3p Regulates Sodium Oxalate Induced Apoptosis and Oxida-tive Stress in HK-2 Cells by Targeting ZNRF1
摘要目的 探索miRNA-30b-3p靶向ZNRF1 调控草酸钠诱导的HK-2 细胞凋亡和氧化应激的研究并探讨其作用机制.方法 将0.2、0.6 μmol/L的草酸钠处理HK-2 细胞,miR-30b-3p mimic和miR-30b-3p in-hibitor及其相对应的对照物转染到HK-2 细胞,CCK-8、Transwell和划痕实验分别检测HK-2 细胞的增殖、侵袭和迁移能力;流式细胞术测量细胞内ROS,ELISA法检测LDH、MDA、GSH活性,蛋白质印迹分析Bax、Bcl-2 的表达情况;荧光素酶报告基因检测验证miRNA-30b-3p及ZNRF1 之间的靶向关系;RNA免疫沉淀分析miRNA-30b-3p及ZNRF1 之间的作用关系.结果 草酸钠处理HK-2 显著增加ROS,LDH和MDA水平,GSH含量明显降低(P<0.01),抑制HK-2 细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,与草酸钠的浓度呈现剂量依赖关系,miR-30b-3p促进草酸钠诱导对HK-2 细胞的影响;靶标预测和荧光素酶测定表明ZN-RF1 是HK-2 细胞中miR-30b-3p的直接靶标,且沉默ZNRF1 逆转miR-30b-3p对草酸钠诱导的HK-2 细胞损伤的影响.结论 miRNA-30b-3p靶向ZNRF1 促进草酸钠诱导的HK-2 细胞凋亡和氧化应激,抑制其增殖、侵袭和迁移.
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