miR-200c靶向ZEB1调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡
miR-200c Regulates Proliferation and Apoptosis of Cervical Cancer Cells via Targeting ZEB1 Expression
摘要目的 探究miR-200c对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制.方法 利用RT-qPCR检测52 例宫颈癌组织及癌旁组织中miR-200c的表达水平,使用miR-200c模拟物或抑制物转染宫颈癌细胞系,RT-qPCR验证转染效率后,使用CCK8 检测转染细胞的增殖水平,流式细胞术检测转染细胞的凋亡水平;生物信息学预测miR-200c的靶基因,荧光素酶报告基因验证其靶向关系;RT-qPCR检测癌组织中靶基因的表达水平,Pearson相关性分析 miR-200c 和靶基因的表达关系;RT-qPCR 和蛋白质印迹检测转染靶基因siRNA或质粒细胞的增殖和凋亡水平.结果 宫颈癌组织中miR-200c的表达显著低于癌旁组织,转染miR-200c模拟物的HT3 细胞增殖水平显著降低,凋亡水平显著增加,而转染miR-200c抑制物的HeLa细胞增殖水平显著增加,凋亡水平显著降低;荧光素酶报告基因实验证实ZEB1 是miR-200c的指标靶标,miR-200c模拟物显著降低ZEB1 表达,而抑制物则发挥相反效应;宫颈癌组织中ZEB1 的表达显著高于癌旁组织,且其表达与miR-200c呈显著负相关关系;敲低 ZEB1 显著抑制 HT3 的增殖水平,促进其凋亡,而过表达ZEB1 则发挥相反效应.结论 miR-200c通过靶向抑制ZEB1 表达调控宫颈癌细胞的增殖与凋亡,从而参与宫颈癌的发生发展.
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