NOP14过表达抑制NRIP1表达及卵巢癌SKOV3细胞的增殖与迁移
NOP14 Overexpression Inhibits NRIP1 Expression and Proliferation and Migration of Ovarian Cancer SKOV3 Cells
摘要目的 探究核仁蛋白14(nucleolar protein 14,NOP14)过表达对卵巢癌SKOV3 细胞增殖与迁移的影响及机制.方法 检测卵巢癌细胞系(SKOV3、A2780、HO-8910、OVCAR)中 NOP14 的表达水平.SKOV3 细胞中转染pcDNA-NOP14 质粒以构建NOP14 过表达细胞系.细胞克隆形成实验和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine,EdU)染色检测细胞增殖能力.无血清成球培养分析肿瘤干细胞特性.流式细胞术检测CD133 阳性细胞比例.细胞形态学观察及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)检测评估EMT进程.蛋白质印迹和RT-qPCR检测核受体相互作用蛋白1(nuclear receptor interacting protein 1,NRIP1)及Wnt、β-catenin的表达水平.结果 在卵巢癌细胞系中NOP14 mRNA和蛋白表达均显著低于正常卵巢上皮细胞.NOP14 过表达后抑制SKOV3细胞增殖、干细胞特性及 EMT 转化(间质标志物 N-cadherin、Vimentin 下调,上皮标志物 E-cadherin 上调),以及NRIP1、Wnt和β-catenin的表达水平.结论 NOP14 可负向调控NRIP1 和Wnt及β-catenin的表达,并抑制卵巢癌SKOV3 细胞的增殖、干细胞特性及EMT进程.
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