换一批摘要目的：探讨基因芯片技术和多重PCR技术用于检测和筛查食源性致病菌的可行性。方法通过设计靶细胞引物序列，采用生物素标记反向引物5′端，氨基基团标记寡核苷酸探针5′端。将探针在固相载体上点样，制备基因芯片，PCR产物与芯片点制探针区域进行杂交，并对PCR杂交反应的体系进行优化。结果基因芯片技术可以同时检测志贺氏菌、沙门氏菌、肺炎克雷伯菌、布鲁氏菌、奇异变形菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌等多种病原菌，操作简便，特异性强。细菌纯培养物灵敏度为5．0×102CFU／mL，DNA检测灵敏度为0．1pg，检测分离菌株符合率为100％。利用引物建立和优化了PCR检测体系，分别确定了Mg2＋浓度和退火温度Tm值为1．5mmol／L和56℃，检测灵敏度达到10pg，此灵敏度下可以扩增出全部特异性引物条带。结论通过基因芯片技术和多重PCR技术可以有效检测食源性致病菌，为高通量筛查检测病原菌提供了新思路，值得在食品安全领域推广应用。
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10.3969/j.issn.1673-4130.2015.07.023
发布时间
2015-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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