13种链球菌超抗原基因的双重实时荧光PCR检测方法的建立
Development of a duplex real-time PCR assay for detecting 13 streptococcal superantigens
摘要目的 建立一新的快速的链球菌超抗原基因检测方法 ,能快速、灵敏及特异地分析样本中存在的各种超抗原基因.方法 根据13种链球菌超抗原基因的保守序列设计特异性引物和探针 ,利用13种超抗原的阳性标本作为模板来优化了反应体系与扩增条件 ,并验证其特异度与灵敏度.结果 利用该研究建立的双重荧光PCR方法体系 ,可以特异性鉴定出13种链球菌超抗原 ,并且与其他呼吸道病原菌也没有交叉反应.另外 ,该检测体系的检测灵敏度高于普通 PCR至少 1~2个数量级(10~100倍)及以上.结论 该研究建立的双重实时荧光PC R法能更加准确、快速地对链球菌菌株中的超抗原基因进行检测分析.
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