乙型脑炎和登革热病毒的环介导等温扩增基因定量检测技术研究
Quantitative detection of the loop mediated isothermal amplification gene in the loopmediated isothermal amplification of Japanese encephalitis and dengue fever
摘要目的 建立一种适合口岸现场快速检测乙型脑炎和登革热病毒的环介导等温扩增(LAMP)定量技术.方法 根据LAMP方法的原理,设计LAMP检测引物和反应体系,建立LAMP检测方法,同时综合评估初始拷贝数值与方法中的灵敏度、特异度、重复性及荧光信号值反应时间(1×104)之间的线性关联.结果 检测选用1套LAMP引物,完成时间为0.5 h,传统PCR检测与LAMP对比,差异明显,LAMP检测可有效提高灵敏度,是PCR检测技术的10倍.循环阈值和模版浓度具有良好的线性联系,实验室变异系数为小于5%.结论 该方法是特异度与灵敏度较高,操作简单、结果判断容易、设备要求低的快速检测方法,适合基层医疗卫生机构和现场查验机构的广泛应用.
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