外排泵在肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星耐药中的作用
Role of efflux pump in the resistance of Klebsiella pneumoniae to levofloxacin
摘要目的 探讨肺炎克雷伯菌(KP)中外排泵OqxAB、AcrAB和QepA介导的左氧氟沙星(LVX)耐药机制.方法 选择分离自南京鼓楼医院集团仪征医院2018年7月至2020年12月的门诊和住院患者的106株KP(剔除同一患者相同部位的重复分离株),采用微量肉汤稀释法检测KP对常用抗菌药物的敏感性,根据药物敏感试验结果随机选择24株对LVX耐药的KP作为试验组,27株LVX非耐药的KP作为对照组.采用羰基氰氯苯腙泵抑制法检测KP的外排泵表型,采用实时定量反转录PCR检测外排泵OqxAB、AcrAB和QepA相应表达基因OqxA、acrB和QepA的表达水平,采用常规PCR及测序检测acrR基因突变.分析两组KP外排泵基因表达水平的差异,LVX最低抑菌浓度(MIC)与外排泵基因表达水平间的关联性,以及两组KP外排泵表型的差异.结果 试验组与对照组KP外排泵表型试验结果差异无统计学意义(P>0.05).两组KP外排泵基因OqxA、QepA表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而acrB表达水平差异有统计学意义(P<0.05),且试验组acrB表达水平与LVX的log2MIC呈正相关(r=0.544,P<0.05).试验组调控因子acrR突变率为58.3%(14株),携带突变型acrR基因的KP(14株)与携带野生型acrR基因的KP(10株)之间acrB表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 外排泵是介导KP对LVX耐药的机制之一,AcrAB在外排泵介导KP对LVX耐药中具有明显作用;OqxAB和QepA虽广泛分布于KP中,但并不是介导KP对LVX耐药的主要机制.
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