肠杆菌目细菌常见碳青霉烯酶耐药基因多重PCR检测方法的建立及应用评价

Establishment and application evaluation of Multiplex PCR Assay for detection of the common carbapenemase genes in Enterobacteriales

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摘要目的探讨多重PCR检测 5 种常见肠杆菌目细菌碳青霉烯酶耐药基因方法的建立及应用评价.方法收集临床分离对碳青霉烯类药物耐药的非重复肠杆菌目细菌 118 株和对碳青霉烯类药物敏感的肠杆菌目细菌 9 株,以普通PCR 检测 blaKPC,blaNDM,blaVIM,blaIMP,blaOXA-48-like 结果为参考.采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验对试验菌株进行碳青霉烯酶表型检测;构建多重PCR检测 5 种常见碳青霉烯酶耐药基因.对多重PCR、抑制剂增强试验与普通 PCR 检测肠杆菌目细菌耐药的灵敏度、特异度和准确度进行比较.结果与普通PCR相比,多重PCR灵敏度为 88.54%,特异度为 100.00%,κ值为 0.79;抑制剂增强试验灵敏度为 92.71%,特异度为 93.55%,κ值为 0.81.在CRE的检测中,虽然多重PCR 检测的灵敏度稍低于碳青霉烯酶抑制剂增强试验,但其在特异度上更具优势;二者在阳性率检测上比较差异无统计学意义(P>0.05),检测一致性良好(κ=0.63).结论该研究成功构建多重PCR 体系,能快速、准确检测肠杆菌目细菌中 5 种常见碳青霉烯酶耐药基因,与临床现行的碳青霉烯酶抑制剂增强试验相比,二者对肠杆菌目细菌耐药检测具有良好的一致性,能极大缩短检测时间.