lncRNA MSC-AS1通过调节miR-429/RhoA轴对人鼻咽癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响
Impacts of LncRNA MSC-AS1 on the proliferation,apoptosis,migration and invasion of human nasopharyngeal carcinoma cells by regulating the miR-429/RhoA axis
摘要目的 探索长链非编码 RNA(lncRNA)MSC-AS1 通过调节微小 RNA(miR)-429/Ras 同源基因家族成员A(RhoA)轴对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.方法 实时荧光定量 PCR 法(qPCR)检测NPC细胞系(CNE-1、HNE2、HONE-1 细胞)以及人鼻咽上皮细胞系 NP69 细胞中 lncRNA MSC-AS1、miR-429、RhoA mRNA 的表达水平.以 CNE-1 细胞为研究对象,将 si-MSC-AS1、miR-429 inhibitor、miR-429 mimics及相应阴性对照分别转染或共转染CNE-1 细胞,记为对照组(未转染)、si-NC组、si-MSC-AS1组、mimics NC 组、miR-429 mimics 组、si-MSC-AS1+inhibitor NC 组、si-MSC-AS1+miR-429 inhibitor 组.MTT法、流式细胞术、Transwell分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;双荧光素酶实验分别验证 miR-429 与MSC-AS1、RhoA的靶向关系;免疫印迹法检测RhoA、B淋巴细胞因子相关 x蛋白(Bax)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞周期素 D1(CyclinD1)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)的表达水平.结果 miR-429 分别与MSC-AS1、RhoA 存在靶向关系.与 NP69 细胞相比,CNE-1、HNE2、HONE-1 细胞中 MSC-AS1、RhoA mRNA的表达水平显著增加,miR-429 表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组、si-NC组相比,si-MSC-AS1 组细胞增殖率、迁移和侵袭数、MSC-AS1、N-cadherin、RhoA、CyclinD1 比较表达水平显著下降,细胞凋亡率、E-cadherin、Bax显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组、mimics NC 组相比,miR-429 mimics组细胞增殖率、迁移和侵袭数、N-cadherin、RhoA、CyclinD1 表达水平显著下降,细胞凋亡率、miR-429、E-cadherin、Bax显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);抑制 miR-429 表达水平可减弱干扰 MSC-AS1对细胞恶性生物学行为的影响(P<0.05).结论 干扰MSC-AS1 可以抑制 NPC细胞增殖、侵袭及迁移,促进其凋亡,可能与 miR-429/RhoA轴有关.
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