miR-602调控神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞生长、侵袭的功能研究
The function of miR-602 in regulating the growth and invasion of neuroblastoma in SH-SY5Y cells
摘要目的 探讨微小RNA-602(miR-602)对神经母细胞瘤(NB)SH-SY5Y细胞生长、侵袭的影响及其可能的机制.方法 实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测人NB细胞系SH-SY5Y和胚肾细胞系HEK-293中miR-602的表达水平.四甲基噻唑蓝(MTT)法检测miR-602对SH-SY5Y细胞生长的影响.Transwell侵袭实验检测miR-602对SH-SY5Y细胞侵袭的影响.筛选miR-602可能的靶基因,并通过荧光素酶报告基因系统结合qPCR技术验证miR-602对靶基因的调控作用.结果 将健康者胚肾HEK-293细胞的表达量标化为1,人NB细胞系SH-SY5Y中miR-602的相对表达水平为3.83±0.85,差异有统计学意义(P<0.01);MTT实验结果显示,miR-602 mimics 组细胞相对活性(1.20±0.05)高于 NC mimics 组(1.00±0.01),而 miR-602 in-hibitor 组细胞相对活性为0.76±0.04低于NC inhibitor组(1.00±0.01),差异均 有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验结果显示,miR-602 mimics组穿膜细胞数[(193.33±8.02)个]高于NC mimics组[(97.33±20.03)个],而 miR-602 inhibitor 组穿膜细胞数[(62.01±11.79)个]低于 NC inhibitor 组[(132.33±11.24)个],差异均有统计学意义(P<0.05);qPCR结果显示,在 miR-602 mimics组重组人Sprouty相关EVH1域含蛋白1(SPRED1)mRNA表达水平较对照NC mimics组相对变化倍数为0.56±0.08,miR-602 inhibitor 组 SPRED1 mRNA 表达水平较对照 NC inhibitor 组相对变化倍数为 4.16±0.91,差异有统计学意义(P<0.01).结论 miR-602在SH-SY5Y细胞中高表达,可能通过调控SPRED1促进SH-SY5Y细胞生长和侵袭.
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