ACE1通过改善H2O2诱导绒毛膜滋养层细胞铁死亡影响妊娠稽留流产发生的机制研究
Mechanism of ACE1 affecting the occurrence of missed pregnancy loss by improving H2O2-induced ferroptosis in chorionic trophoblast cells
摘要目的 探讨血管紧张素转换酶1(ACE1)通过改善过氧化氢(H2O2)诱导绒毛膜滋养层细胞铁死亡影响妊娠稽留流产发生的机制.方法 使用人绒毛膜滋养层细胞HTR-8SVneo进行实验,建立H2O2诱导铁死亡模型,转染ACE1表达载体(pcDNA3.1-ACE1)、ACE1抑制剂(ACE1-siRNA)至细胞,使用实时荧光定量PCR(qPCR)验证转染效果.CCK-8检测各组细胞的细胞活力,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,Ferrozine法测定细胞中的游离铁离子(Fe2+)水平,TBARS法评估各组细胞的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平,蛋白印迹法(Western blot)检验谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)蛋白表达水平.结果 CCK-8检测结果显示,H2O2+ACE1处理组的细胞活力较H2O2处理组增强(P<0.05);荧光探针DCFH-DA结果显示,H2O2+ACE1处理组的ROS水平较H2O2处理组降低(P<0.05);Ferrozine法测定细胞中的游离Fe2+水平结果显示,H2O2+ACE1处理组的游离Fe2+水平较H2O2处理组降低(P<0.05);TBARS法评估脂质过氧化产物MDA水平结果显示,H2O2+ACE1处理组的MDA水平较H2O2处理组降低(P<0.05);Western blot结果显示,H2O2+ACE1处理组的GPX4和FTH1蛋白表达水平较H2O2处理组升高(P<0.05).结论 ACE1通过抑制H2O2诱导的铁死亡机制,改善了绒毛膜滋养层细胞的存活率,减少了细胞凋亡和坏死,从而可能在预防和治疗妊娠稽留流产中发挥重要作用.
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