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石蜡包埋组织样本中人乳头瘤病毒的检测方法

Detection methods for human papillomavirus in paraffin-embedded tissue samples

摘要目的:人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与多种疾病的发生、发展相关,明确HPV的感染状态对多种疾病的诊治具有重要意义.本研究选取宫颈细胞学HPV检测阳性患者的活检标本,探索石蜡包埋组织样本中HPV的检测方法.方法:选取宜昌市中心人民医院病理科2024年1月至2024年12月宫颈细胞学HPV检测阳性患者同一时间行宫颈活检的石蜡包埋组织样本30例,其免疫组织化学指标细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,CDKN2A,又称p16蛋白)检测均为阳性.通过对比不同检测方法(流式荧光法和杂交芯片法)、不同DNA提取方法(磁珠法和柱提法)、不同数量组织样本(6 μm的石蜡切片6张、8张、10张及12张)的检测结果,以确定石蜡包埋组织样本中HPV检测的最优方法.结果:使用6 μm的石蜡切片8张,采用柱提法提取石蜡组织样本的DNA经PCR扩增后,采用流式荧光法对石蜡组织样本中的HPV进行检测、分型的敏感度及内控合格率最高[内控合格率为90%(27/30),检测敏感度为87%(26/30)].结论:本研究建立的石蜡包埋组织样本中HPV检测的方法具有操作简便、可具体分型的特点,且结果客观、无需人工判读.该方法检测准确性高、稳定性好,可广泛应用于HPV相关疾病的病理诊断与分子分型,可为临床治疗策略的制订及预后判断提供可靠依据,具备显著的临床应用价值.

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