血凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞氧化应激中的作用

Effects of Lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1 on oxidative stress of macrophages induced by oxidized low-density lipoprotein

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摘要目的:探讨血凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞氧化应激中的作用.方法:将生长至对数增殖期的巨噬细胞随机分成对照组、空质粒对照组(pCon组)、ox-LDL组、LOX-1-小干扰RNA(siRNA)+ox-LDL组,分别测定各组丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,荧光显微镜及流式细胞仪检测各组巨噬细胞活性氧(ROS)水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot法检测各组还原型烟酰胺腺嘌吟二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)核心酶NOX2及亚组分p22phox的mRNA及蛋白表达水平.结果:(1)与对照组、pCon组比较,ox-LDL组MDA含量明显升高,SOD活性明显下降;与ox-LDL组比较,LOX-1-siRNA+ox-LDL组MDA含量明显下降,SOD活性明显升高.(2)荧光显微镜、流式细胞仪检测示ox-LDL组巨噬细胞ROS平均荧光强度较正常对照组、pCon组显著增加,而LOX-1-siRNA+ox-LDL组较ox-LDL组显著降低,pCon组与对照组相比差异无统计学意义.(3)实时定量PCR及Western blot检测示ox-LDL组NOX2、p22phox的mRNA和蛋白表达水平较对照组、pCon组显著升高,LOX-1-siRNA+ox-LDL组NOX2、p22phox的mRNA和蛋白表达水平较ox-LDL组则明显下降.结论:LOX-1与ox-LDL作用可使巨噬细胞NOX2、p22phox表达增加,进而促进ROS生成,LOX-1在ox-LDL诱导的巨噬细胞氧化应激中起促进作用.