换一批用磁性纳米粒辅助微波诱变新方法改造无活性放线菌代谢功能的研究
Alteration of secondary metabolism of inactive actinomycete strain by magnetic nanoparticle-aided microwave mutagenesis
摘要目的 探索用Fe3O4磁性纳米粒辅助微波诱变来改造无活性放线菌代谢功能的新方法并筛选获得抗肿瘤活性突变株.方法 以海洋来源无活性放线菌野生株HLF-43(1000μg/ml样品对K562细胞的抑制率为3.9%)为原始菌,对其孢子悬液在Fe3O4磁性纳米粒子存在下进行微波辐照诱变,再经抗性筛选获得新霉素抗性突变株,并经对原始菌及其突变株的发酵培养与抗肿瘤活性筛选获得活性突变株.采用MTT法用K562细胞测试抗肿瘤活性.结果 初步建立了改造放线菌代谢功能的Fe3O4磁性纳米粒辅助微波诱变新方法,并利用该方法由无活性原始株HLF-43筛选获得了新霉素抗性突变株共80株,其中28株发酵样品对K562细胞有抑制活性,100μg/ml浓度下的抑制率大于20%.活性突变株获取率达35%(28/80),所获活性突变株的遗传性状也较稳定.结论 与不加Fe3O4磁性纳米粒子的微波辐照结合新霉素抗性筛选实验相比,该方法更有利于筛选获得高浓度新霉素抗性突变株,同时活性突变株获得率也有大幅度提高,活性突变株的遗传性状也获改进.
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分类号
R979.1（药品）
DOI
10.3969/j.issn.1674-0440.2010.06.008
发布时间
2011-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金项目（(30572279,30973631)）
国家高技术研究发展计划项目（(2007AA09Z411)）
国家科技重大专（(2009ZX09103-019,2009ZX09301-002)）
中国大洋协会国际海底区域研究开发项目（(DYXM-115-02-2-09)）
军事医学科学院科研创新基金重大专项(2008)
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