换一批基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术同时定量反义寡核苷酸药物原型及其代谢物方法的初步建立
Simultaneous quantification of antisense oligonucleotides and its metabolite in biological samples by a nucleic acid hybridization combined enzyme-linked bridging method based on suspension array technology
摘要目的 利用悬浮芯片技术,建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物同时定量的分析方法.方法 本研究在确证探针与微球偶联的基础上,考察生物基质效应、偶联微球浓度、检测探针浓度、S1核酸酶用量以及荧光显色液浓度等因素对方法定量的影响.最终在同一生物样品中对反义寡核苷酸原型及其代谢产物进行同时定量分析.结果 通过考察生物基质效应,确定稀释10倍的PBS作为条件优化及样品定量分析的生物学基质;微球浓度为150个/μl,检测探针浓度为400 nmol/L,S1核酸酶用量为1 U/孔,荧光显色液浓度为1μg/ml.在猕猴血浆基质中该方法针对原型与代谢产物序列的定量范围均为7.81 ～ 2000 nmol/L.在同时含有低浓度(20 nmol/L)和高浓度(1500 nmol/L)AI-ON1原型(Ai)与AI-ON1缩短代谢产物(Am)的混合血浆样品中,该方法可同时特异性地定量分析Ai与Am.结论 本研究成功建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片定量分析方法,可在微量生物样品中实现对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物的同时定量分析.
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关键词
悬浮芯片技术核酸杂交-酶联桥接系统反义寡核苷酸药物药代动力学suspension array technologynucleic acid hybridization-enzyme-linked bridging systemantisense oligonucleotidespharmacokinetics
医学主题词
核酸杂交(Nucleic Acid Hybridization)药用制剂(Pharmaceutical Preparations)代谢(Metabolism)方法(Methods)药代动力学(Pharmacokinetics)
栏目名称
DOI
10.13220/j.cnki.jipr.2014.01.019
发布时间
2014-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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