灵芝孢子粉指纹图谱建立及灵芝孢子油抗炎活性研究

Establishment of the fingerprint of ganoderma lucidum spore powder and study on the anti-inflammatory activity of ganoderma lucidum spore oil

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摘要目的建立灵芝孢子粉的指纹图谱检测方法,探讨灵芝孢子油对炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-a的影响.方法采用高效液相色谱法(HPLC)和高效薄层色谱法(HPTLC)分析不同产地灵芝孢子粉的化学成分;采用MTT法测定细胞活力;ELISA法测定RAW264.7细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-a的表达水平.结果 HPLC指纹图谱标定共有峰12个,其中峰1～5号分别为灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸D;HPTLC现行版药典法显示10批样品均符合规定,采用三氯甲烷-乙腈-甲醇-甲酸(26∶4∶1∶1)为展开剂进行2次展开后,不同产地的原料质量斑点差异显著,与 HPLC指纹图谱相似.灵芝孢子油浓度≤180 μg/mL时,对RAW264.7细胞活性无明显影响;对LPS诱导的RAW264.7细胞的保护作用呈剂量依赖性;与模型组相比,中剂量组(90 μg/mL)显著降低IL-1β表达(P＜0.05),高剂量组(180 μg/mL)显著降低IL-6和TNF-α的表达(P＜0.05),轻微降低IL-1β的表达,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论灵芝孢子油是通过抑制炎症因子的释放来减轻机体的炎症,达到对免疫细胞的保护作用.通过HPTLC可初步鉴定孢子粉的质量,HPLC指纹图谱可精准控制原料质量,保障灵芝孢子油功效.