五子衍宗丸对少弱精子症小鼠生精功能、IP6K1表达及线粒体DNA甲基化影响
Effects of Wuzi Yanzong Pills on spermatogenesis,IP6K1 expression and mitochondrial DNA methylation in oligoasthenospermia mice
摘要目的 探讨五子衍宗丸对少弱精子症小鼠生精功能、六磷酸肌醇激酶 1(IP6K1)表达及线粒体DNA(mtDNA)甲基化的影响.方法 将雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组及五子衍宗丸(1、2、4 g/kg)组,每组 10 只.除对照组外,其他各组单次ip 40 mg/kg白消安.从造模第 2 天开始,各组按剂量ig给药,给药 4 周后计算睾丸和附睾脏器系数,检测精子数量和活力,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠睾丸病理组织学改变,TUNEL染色观察睾丸细胞凋亡情况,RT-qPCR、Western blotting和免疫组化(IHC)染色检测IP6K1 表达,Western blotting检测DNA甲基转移酶 1(DNMT1)表达,焦磷酸测序检测mtDNA D-loop甲基化,RT-qPCR检测线粒体基因表达.结果 五子衍宗丸可恢复少弱精子症小鼠的睾丸和附睾系数,显著提高精子数量和活力,明显改善睾丸组织病理学损伤和生精细胞的凋亡,显著促进IP6K1的表达,显著抑制DNMT1表达和线粒体D-loop甲基化水平,显著上调线粒体编码基因的表达(P<0.5、0.1、0.001).结论 五子衍宗丸可改善少弱精子症小鼠的生精功能,其机制可能与促进IP6K1 表达,抑制DNMT1/mtDNA D-loop甲基化,进而促进线粒体编码基因的表达有关.
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