香叶醇调控ALKBH5对乳腺癌细胞上皮间质转化的影响
Effect of geraniol on epithelial mesenchymal transition of breast cancer cells by regulating ALKBH5
摘要目的 探讨香叶醇调控烷基化修复蛋白B同源物 5(ALKBH5)对乳腺癌细胞上皮间质转化的影响.方法 以0、6.25、12.5、25、50、100、200 μg/mL香叶醇分别处理人乳腺癌MCF-7细胞24 h,筛选合适的香叶醇处理剂量.MCF-7细胞分为对照组、香叶醇(25、50、100 μg/mL)组、香叶醇+空白质粒组、香叶醇+ALKBH5 组,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色、CCK-8 法检测细胞增殖;Western blotting检测细胞中ALKBH5、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白;Transwell、划痕实验分别检测细胞侵袭、迁移;qRT-PCR检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9、迁移侵袭增强子(MIEN1)、MMP-2 mRNA表达.结果 与0 μg/mL香叶醇比较,6.25、12.5、25、50、100、200 μg/mL香叶醇作用后的MCF-7 细胞活力均显著降低(P<0.05),选取香叶醇质量浓度为 25、50、100 μg/mL作为后续处理浓度.与对照组比较,香叶醇 25、50、100 μg/mL组MCF-7 细胞EdU阳性率、A450 值、ALKBH5、N-cadherin、Vimentin蛋白表达、细胞侵袭数、划痕愈合率及MMP-9、MIEN1、MMP-2 mRNA表达降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05).与香叶醇100 μg/mL组、香叶醇+空白质粒组比较,香叶醇+ALKBH5 组MCF-7 细胞EdU阳性率、A450 值、ALKBH5、N-cadherin、Vimentin蛋白表达、细胞侵袭数、划痕愈合率及MMP-9、MIEN1、MMP-2 mRNA表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05).结论 香叶醇可能通过下调ALKBH5 抑制MCF-7 细胞上皮间质转化,进而减弱细胞侵袭与迁移能力.
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