摘要为探究鹿衔草(Pyrola calliantha H.Andres)中活性成分对裂谷热病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)的抑制活性及作用机制,本研究利用表达增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)的裂谷热病毒模型(RVFV-EGFP)对鹿衔草成分进行抗病毒活性筛选,并通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法评价这些活性成分的安全性.首先,利用高内涵成像分析系统检测在不同时间点或不同阶段给药对宿主细胞EGFP阳性率的影响;其次,通过RVFV糖蛋白Gc介导的细胞-细胞融合评价活性成分对RVFV膜融合的抑制作用;最后,利用计算机分子对接技术预测活性成分与RVFV糖蛋白Gn、Gc之间的相互作用.从鹿衔草中筛选出的积雪草酸、铁冬青酸、槲皮素对RVFV有抑制效果,其选择指数(Selection Index,SI)分别为1.52、0.78和4.68.槲皮素在预处理病毒、吸附期给药和感染后给药阶段均能降低细胞EGFP阳性率(P＜0.01),其中感染后0 h给药抑制率达83.6％(P＜0.000 1),而预处理细胞组无显著变化.进一步实验表明槲皮素能够抑制Gc介导的合胞体的形成,提示槲皮素主要作用于病毒感染细胞的早期,即吸附和膜融合阶段.分子对接显示槲皮素与Gn和Gc的对接能量分别为-8.5 kcal/mol和-5.2 kcal/mol,该成分与Gn的氨基酸残基 GLY-10、THR-30、ASP-217、CYS-221、PHE-244,以及 Gc 的氨基酸残基 CYS-691、LYS-748、ASN-1077存在氢键作用.本研究从鹿衔草中筛选出槲皮素的抗RVFV性能最佳,并对其抑制RVFV的机制进行研究,为天然产物抗RVFV药物研发提供新思路.