换一批根癌农杆菌Ⅵ型分泌系统关键组分ClpⅤ型ATPase基因表达及活性位点分析
Biochemical Characterization of ClpⅤ Type ATPase,the Key Component of Type Ⅵ Secretion System in Agrobacterium tumefaciens C58
摘要细菌Ⅵ型分泌系统（type Ⅵ secretion system,T6SS）是近年发现的一种分布广泛且与细菌致病性密切相关的新型分泌系统,ClpⅤ型ATPase是不同细菌T6SS中均含有的关键保守组分,据推测可能为底物蛋白的分泌提供动力,但对其生化功能尚未进行深入鉴定。在本研究中,我们克隆了根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）C58中的ClpⅤ型ATPase基因atu4344并在大肠杆菌中表达,酶学检测证实了其ATPase活性,定点突变分析发现K232/608和E299/675突变体均丧失ATPase活性,表明Walker A模体和Walker B模体与其活性密切相关。这是首次对植物病原细菌T6SS中的ClpⅤ型ATPase进行生化鉴定和突变分析研究。
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关键词
根癌农杆菌ClpⅤ型ATPase基因酶学活性突变分析Agrobacterium tumefaciensClpⅤ type ATPaseEnzyme assaySite-directed mutagenesis
分类号
Q943.2（植物细胞遗传学）
栏目名称
发布时间
2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30570020;30770026）
西北农林科技大学人才专项（Z111021007）
感谢西北农林科技大学生命学院沈锡辉教授提供根癌农杆菌C58菌株和相关质粒,感谢中科院武汉病毒研究所袁志明研究员提供实验技术支持
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