换一批
换一批摘要目的:探讨用多重二次PCR扩增极微量DNA标本供后续SSCP和DNA测序分析.方法:对照组取微量组织提取的DNA为模板,分别用不同的4对引物各自行PCR,同一PCR反应体系里加入4对引物扩增.然后将此扩增产物稀释1 000倍为模板,再以相同引物进行第二次PCR.实验组:取微量组织提取的DNA为模板,以与对照组相同的4对引物各自进行PCR.用琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果,用DNA测序方法检测二次PCR扩增产物的特异性.结果:微量的DNA标本可同时被多对引物二次扩增.实验组与对照组比较,各自引物扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶电泳显示区带速率相同,测序显示碱基序列相同.结论:因极微量的DNA模板不能满足多引物多次PCR时,可用多重二次PCR扩增,本方法在法医学、考古和组织活检等方面将有广阔的用途.
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