新生小鼠Sca-1+心脏干细胞的分离与鉴定
Isolation and identification of Sca-1 positive cardiac stem cells in newborn mice
摘要目的:分离、纯化新生小鼠干细胞抗原-1(Sca-1)阳性心脏干细胞,观察其特异性标记物.方法:将新生小鼠的心脏剪碎后用Ⅱ型胶原酶及胰酶反复消化.组织法培养10~14 d后结合免疫磁珠进行阳性分选出Sca-1+心脏干细胞.分选纯化后的细胞通过流式细胞术和免疫荧光的方法进行Sca-1的鉴定,并通过免疫荧光的方法鉴定心源性转录因子GATA-4和Nkx-2.5的相关蛋白.结果:组织培养和磁珠分选法结合成功分离并纯化了小鼠Sca-1+心脏干细胞.分选后流式结果显示Sca-1+心脏干细胞可达(62.8±1.3)%.免疫荧光显示Sca-1、GATA-4及Nkx-2.5均为阳性表达.结论:组织培养结合磁珠分选能成功分离纯化新生小鼠Sca-1+心脏干细胞,且能稳定培养.细胞表达心源性转录因子相关蛋白GATA-4及Nkx-2.5.
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