换一批
换一批NMDA受体在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞表达体系中的建立
Methods to establish Xenopus laevis oocytes and HEK-293 cells expressing NMDA receptors
摘要目的:建立特异性表达NMDA受体(NMDAR) NR2AR、NR2BR亚型的爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞模型,选出合适的表达体系模型,为研究药物对NMDAR介导电流的影响奠定基础.方法:分别采用显微注射法和脂质体转染法将NMDAR表达在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞上,利用全细胞膜片钳技术,记录NMDAR亚型NR2AR、NR2BR介导的电流.结果:在建立的爪蟾卵母表达体系中,NMDAR基因注射成功率为100％,且能检测到NMDAR亚型NR2AR和NR2BR介导的内向电流,而在HEK 293表达体系中,转染成功率为(6.7±1.39)％,未检测到NMDAR介导的电流.结论:成功建立爪蟾卵母细胞NMDAR表达体系,可作为研究药物对爪蟾卵母细胞表达体系上NMDAR电流影响的合适的细胞表达体系模型.在HEK-293表达体系上未检测到相关电流,可能与其转染后细胞活性大大降低、脂质体转染效率低等因素有关.
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关键词
爪蟾卵母细胞HEK 293细胞NMDA受体全细胞膜片钳技术Xenopus laevis oocytesHEK-293 cellsNMDA receptorwhole-cell patch-clamp
分类号
R329
栏目名称
基础研究
DOI
10.16190/j.cnki.45-1211/r.2018.06.009
发布时间
2018-07-11
基金项目
国家自然科学基金资助项目
广西自然科学基金资助项目
广西教育厅高等学校资助科研项目
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