摘要目的:基于体外细胞实验、网络药理学和分子对接探讨柴胡皂苷A(SSA)对糖尿病肾病(DN)的作用及其可能的分子机制.方法:取大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,通过MTT测定SSA的细胞毒性,筛选SSA安全浓度并检测其对高糖(HG)诱导的细胞活性氧(ROS)水平的影响.Western blotting法检测纤维化相关指标FN蛋白表达.基于Swiss Target Prediction平台、UniProt数据库及TCMSP数据库,筛选SSA作用靶点;通过OMIM数据库与GeneCards数据库联用,筛选DN靶点.采用韦恩图获取两者交集靶点,运用STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,Cytoscape 3.9.1软件行可视化分析,筛选核心靶点;DAVID平台行GO和KEGG富集分析,再利用Cytoscape 3.9.1软件构建SSA—关键靶点—通路—DN网络图,CB-Dock2完成药物—靶点分子对接,RT-qPCR验证SSA可能作用的靶点.结果:≤8 μmol/L SSA对NRK-52E细胞无明显毒性作用(P＞0.05),0.5 μmol/L SSA对HG诱导的NRK-52E细胞ROS过度产生抑制作用最明显(P＜0.05),1 μmol/L SSA能显著抑制HG诱导的FN上调(P＜0.05).SSA抗DN的潜在作用靶点共35个,排名前5的核心靶点为EGFR、MYC、STAT3、CASP3和JUN.与SSA抗DN机制相关的信号通路主要有PI3K-AKT、AGE-RAGE、EGFR等.SSA与 EGFR、MYC、STAT3、CASP3、JUN具有较好的结合作用(结合能小于-5 kcal/mol).SSA能降低EGFR、MYC、STAT3、CASP3和JUN mRNA表达水平(P＜0.05).结论:SSA能够抑制HG诱导的ROS过度产生和FN异常表达,从而改善NRK-52E细胞损伤;SSA抗DN机制可能与调节EGFR、MYC、STAT3、CASP3、JUN等靶点及PI3K-AKT、AGE-RAGE、EGFR等信号通路有关.