腺病毒5型早期区1A基因对人肝癌细胞株HepG2辐射敏感性的影响及其作用机制

Effect of adenovirus type 5 early region 1A gene on radiosensitivity of human hepatoma cell line HepG2 and its mechanism

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摘要目的探讨腺病毒5型早期区1A(E1A)基因对人肝癌细胞HepG2辐射敏感性的影响及其作用机制.方法取对数生长期HepG2细胞分为HepG2-E1A组、HepG2-vect组、HepG2组(耒转染的HepG2细胞).HepG2-E1A组、HepG2-vect组以聚乙烯亚胺纳米凝胶(PEI)为载体,分别将含E1A基因的重组质粒psv-E1A、未携带E1A基因的质粒转染进入HepG2细胞中.检测转染后3组HepG2细胞中E1A mRNA及蛋白的表达情况,以及细胞周期分布情况.3组细胞均分别接受0、1、2、4和8 Gy的6 MV-X线照射,72 h后检测3组的细胞存活率,24h及72 h后检测3组的细胞凋亡率.结果在HepG2-E1A组的细胞中可见E1A mRNA、E1A蛋白表达.当辐射剂量为2 Gy及以上时,HepG2-E1A组细胞的存活率均低于其他两组细胞(P＜0.05);以1 Gy、2Gy、4 Gy、8 Gy的剂量分别照射24h及72 h后,HepG2-E1A组细胞的凋亡率均高于其他两组(P＜0.05).与HepG2-vect组和HepG2组相比,HepG2-E1A组G2/M期细胞比例升高,而S期细胞比例降低(均P ＜0.05),但3组G1期细胞比例比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PEI能将质粒psv-E1A转染至肝癌细胞.EIA基因能够明显提高人肝癌细胞对辐射的敏感性,其作用机制可能与E1A促进凋亡并导致S期抑制、G2期阻滞有关.

作者徐党辉 ^[1] 姚建新 ^[2] 李占峰 ^[2] 潘志尧 ^[3] 姚志峰 ^[4] 学术成果认领

作者单位南京中医药大学附属医院放射科,江苏省南京市,210029 ^[1] 江苏联合职业技术学院南京卫生分院医学影像系,南京市,210038 ^[2] 浙江大学医学部基础医学院生物化学系,杭州市,310058 ^[3] 南京医科大学第二附属医院肿瘤医学中心放射治疗科,江苏省南京市,210011 ^[4]

关键词人肝癌细胞腺病毒5型早期区1A 基因转染聚乙烯亚胺载体辐射敏感性 Human hepatoma cell Adenovirus type 5 early region 1A Gene transfection Polyethylenimine Radiosensitivity

主题词细胞(Cells)基因(Genes)肝肿瘤(Liver Neoplasms)人(Persons)辐射耐受性(Radiation Tolerance)

分类号 R735.7

栏目名称 论著·基础研究

DOI 10.11675/j.issn.0253-4304.2017.12.34

发布时间 2018-05-07

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