换一批DOK3基因表达下调对原代结肠癌细胞生物学行为的影响及其可能机制
Effect of down-regulated expression of DOK3 gene on biological behavior of primary colon cancerous cells and its possible mechanism
摘要目的 分析对接蛋白3(DOK3)基因表达下调对原代结肠癌细胞增殖、侵袭/迁移能力的影响,并基于DOK3与G蛋白偶联受体84(GPR84)的相互作用探讨可能的作用机制.方法 培养原代结肠癌细胞HCT16,将其分为对照组、小干扰RNA(siRNA)-NC组、siRNA-DOK3组进行实验.分别将siRNA-NC、siRNA-DOK3转染至siRNA-NC组、siRNA-DOK3组,而仅将培养液加入对照组.培养24 h后通过实时荧光定量PCR评估转染效果,再使用CCK-8法、Transwell实验分别检测各组细胞的增殖情况、侵袭/迁移能力,采用蛋白免疫共沉淀实验检测HCT16细胞中DOK3与GPR84之间的相互作用关系.结果 与对照组比较,siRNA-DOK3组HCT16细胞中DOK3 mRNA表达量降低(P<0.05),而siRNA-NC组HCT16细胞中DOK3 mRNA表达量差异无统计学意义(P>0.05).培养48 h、72 h后,siRNA-DOK3组HCT16细胞的增殖活力较对照组增加(P<0.05).与对照组相比,siRNA-DOK3组HCT16细胞的迁移和侵袭数量增加(P<0.05),而siRNA-NC组HCT16细胞的迁移和侵袭数量差异无统计学意义(P>0.05).蛋白免疫共沉淀实验结果显示,在HCT16细胞中GPR84与DOK3相互结合.结论 DOK3基因可能作为抑癌基因,参与了结肠癌的发生与发展,且其可能通过与GPR84结合发挥抑癌作用.
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关键词
结肠癌对接蛋白3G蛋白偶联受体84原代结肠癌细胞恶性生物学行为抑癌基因Colon cancerDocking protein 3G protein-coupled receptor 84Primary colon cancerous cellsMalignant biological behaviorTumor suppressor genes
分类号
R735.3+5（消化系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.11675/j.issn.0253-4304.2023.23.11
发布时间
2024-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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