摘要目的 探讨Notch1和Notch2基因对肾小球足细胞的增殖和凋亡的作用.方法 (1)构建足细胞Notch1和Notch2基因沉默和激活模型.将足细胞分为NC组、Notch1-短发夹RNA(shRNA)组(包括sh1组、sh2组、sh3组)、Notch2-shRNA组(包括sh4组、sh5组、sh6组)和沉默阴性对照组(SC313组),以及空载组(VP64组)、Notch1-小向导RNA(sgRNA)组(包括sg1组、sg2组、sg3组)、Notch2-sgRNA组(包括sg4组、sg5组、sg6组)和激活阴性对照组(OC276组).进行相应转染处理后,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测足细胞系Notch1和Notch2的mRNA和蛋白的表达水平,验证细胞模型,并筛选激活和沉默效率最高的序列用于后续实验.(2)细胞增殖和凋亡检测.将足细胞分为NC组、sh2组(Notch1沉默组)、sh4组(Notch2沉默组)、sg3组(Notch1激活组)、sg5组(Notch2激活组)、SC313组、OC276组、VP64组.进行相应转染处理后,采用CCK-8及TUNEL实验检测足细胞增殖率和凋亡指数.结果 成功构建Notch1和Notch2基因沉默或激活的肾小球足细胞系,实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,sh2组、sg3组、sh4组、sg5组的沉默或激活效率最高.与NC组比较,sh2组和sg5组吸光度值升高,sh4组和sg3组吸光度值降低,sh4组和sg3组细胞凋亡指数升高(P<0.05).结论 Notch1基因的过表达和Notch2基因的沉默均可抑制足细胞的增殖,促进足细胞凋亡,两者在足细胞的增殖及凋亡中发挥重要的调控作用.