首页 > 广西医学 > 1,25(OH)2D3对棕榈酸诱导的小鼠AML12细胞脂质堆积和氧化应激的影响及其作用机制

1,25(OH)2D3对棕榈酸诱导的小鼠AML12细胞脂质堆积和氧化应激的影响及其作用机制

Effect of 1,25(OH)2D3 on palmitic acid-induced AML12 cells lipid accumulation and oxidative stress in mice and its mechanism

二维码有效期 120s

摘要目的探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对棕榈酸(PA)诱导的小鼠AML12细胞脂质堆积、氧化应激的影响及其作用机制.方法将小鼠AML12细胞分为对照组、1 nM 1,25(OH)2D3组、5 nM 1,25(OH)2D3组、10 nM 1,25(OH)2D3组、50 nM 1,25(OH)2D3组、100 nM 1,25(OH)2D3组、200 nM 1,25(OH)2D3组、300 nM 1,25(OH)2D3组,对照组仅加入DMEM-F12完全培养基,其余组分别加入相应浓度的1,25(OH)2D3的DMEM-F12完全培养基干预24 h.另外取部分小鼠AML12细胞,给予200 μM PA干预24 h,构建非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型,将构建成功的NAFLD细胞分为PA模型组、PA+1 nM 1,25(OH)2D3组、PA+5 nM 1,25(OH)2D3组、PA+10 nM 1,25(OH)2D3组、PA+50 nM 1,25(OH)2D3组、PA+100 nM 1,25(OH)2D3组、PA+200 nM 1,25(OH)2D3组及PA+300 nM 1,25(OH)2D3组,PA模型组仅加入DMEM-F12完全培养基,其余组分别加入相应浓度的1,25(OH)2D3的DMEM-F12完全培养基干预24 h,然后检测各组小鼠AML12细胞的增殖活力,筛选出1,25(OH)2D3的最佳干预浓度(100 nM).选取对照组、PA模型组、PA+100 nM 1,25(OH)2D3组、100 nM 1,25(OH)2D3组,检测各组小鼠AML12细胞增殖活力、细胞内活性氧和丙二醛及甘油三酯(TG)含量,以及沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)、腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPKα)和磷酸化AMPKα(p-AMPKα)的表达水平.结果 PA+1 nM 1,25(OH)2D3组、PA+5 nM 1,25(OH)2D3组、PA+10 nM 1,25(OH)2D3组、PA+50 nM 1,25(OH)2D3组、PA+100 nM 1,25(OH)2D3组、PA+200 nM 1,25(OH)2D3组及PA+300 nM 1,25(OH)2D3组的小鼠AML12细胞增殖活力较PA模型组升高,且PA+100 nM 1,25(OH)2D3组的小鼠AML12细胞增殖活力较PA+其余浓度1,25(OH)2D3 组升高(P<0.05).与对照组相比,PA模型组的小鼠AML12细胞增殖活力降低,TG、活性氧和丙二醛含量增加,Sirt1、p-AMPKα和AMPKα表达水平减少(P<0.05).与PA模型组相比,PA+100 nM 1,25(OH)2D3组及100 nM 1,25(OH)2D3组小鼠AML12细胞中TG、活性氧和丙二醛含量减少,Sirt1、p-AMPKα和AMPKα表达水平增加(P<0.05).结论 1,25(OH)2D3可增加PA诱导的小鼠AML12细胞的增殖活力,减轻其脂肪堆积、氧化应激和脂质过氧化,其机制可能是通过激活Sirt1/AMPK信号通路,增加Sirt1和AMPK磷酸化,从而改善NAFLD的肝损伤.