换一批多倍体罗汉果PCR-RFLP参数的优化与应用
Optimization and preliminary study on the PCR-RFLP parameter of polyploidy Siraitia grosvenorii
摘要以多倍体罗汉果DNA为材料,采用L16(4~5)正交组合试验和单因素梯度试验,研究Mg~(2+)、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA浓度和退火温度、循环次数等对PCR扩增结果以及内切酶量、酶切时间对酶切反应的影响.结果表明,多倍体罗汉果RFLP最优PCR反应体系和扩增参数为:在25 μL扩增反应体系中,10×Buffer 2.5 μL,MgCl_2 1.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物0.1 μmol/L,Taq DNA聚合酶2.0 U,模板DNA 60 ng;退火温度为56 ℃,循环次数为35次.酶切反应体系:内切酶10×Buffer 2.0 μL,内切酶5.0 U,PCR产物15 μL,超纯水补至20 μL;酶切时间2 h.
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关键词
多倍体罗汉果PCR-RFLP酶切反应优化与应用polyploidy Siraitia grosvenoriiPCR-RFLPdigestion reactionoptimization and application
分类号
Q943（植物细胞遗传学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-3142.2009.06.040
发布时间
2010-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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