换一批OsRUS2.1酵母双杂交猎物载体的构建及其细胞毒性和自激活作用检测
*Construction of OsRUS 2 .1 yeast two‐hybrid prey vectors and detection of their toxicity and self‐activated activity
摘要采用 PCR 技术扩增水稻根 UV‐B 敏感基因2.1(ROOT UV‐B S EN S IT IV E 2.1,RUS2.1)四个不同片段[OsRUS2.1(1‐1317),OsRUS2.1(1‐138),OsRUS2.1(139‐879),OsRUS2.1(880‐1317)],连接到 T 载体pMD18‐T‐Simple 上,测序无误后分别亚克隆到猎物表达载体 pGADT7上.结果表明:四个 OsRUS2.1基因片段的表达载体构建成功,读码框正确;分别转化这四个猎物表达载体于酵母感受态细胞 Y187中,用 LacZ 、M EL1活性检测法和营养缺陷型培养基 SD‐Leu‐DO 培养法进行自激活检测和毒性检测,结果表明构建的四个 OsRUS2.1不同片段的猎物表达载体对酵母菌株 Y187均没有转录激活活性和毒害作用,可用于后续研究.
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关键词
水稻根对敏感基因 2.1猎物载体酵母双杂交自激活毒性检测rice ROOT UV‐B SENSITIVE 2 .1(OsRUS2 .1)prey vectoryeast two hybridself‐activated transcrip‐tional activitytoxicity detection
发布时间
2013-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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