换一批油茶两个响应干旱NAC转录因子的克隆、亚细胞定位及自激活检测
Cloning,subcellular localization,and self-activation detection of two NAC transcription factors in response to drought for Camellia oleifera
摘要干旱胁迫是影响油茶生长发育、产量和品质的一类主要的非生物胁迫.NAC转录因子在植物响应干旱、盐碱等非生物胁迫反应中具有重要的调控作用.为探究NAC转录因子在油茶响应干旱胁迫中的调控机制,该文以两年生油茶苗为材料,通过TA克隆得到CoNAC5与CoNAC79的CDS序列,对其进行生物信息学分析、亚细胞定位及自激活分析,并采用qRT-PCR检测CoNAC5与CoNAC79基因表达的组织特异性及PEG模拟干旱和ABA处理下的表达模式.结果表明:(1)基因结构分析显示,CoNAC5与CoNAC79的CDS长分别为1 044 bp和990 bp,分别编码348个和330个氨基酸,理论等电点分别为8.86和8.57,蛋白的不稳定系数分别为41.35和37.47,均无跨膜结构域,分别与柿子和荔枝的同源性最高.亚细胞定位显示CoNAC5与CoNAC79的均定位在细胞核上.(2)酵母自激活检测显示,CoNAC5与CoNAC79的全长蛋白和N端结构域无自激活活性,但C端结构域均具有自激活活性.(3)CoNAC5与CoNAC79表达具有明显的组织特异性,主要在根和种仁中高表达;PEG模拟干旱和外源施加ABA处理油茶苗发现,CoNAC5和CoNAC79表达量均显著高于对照;CoNAC79的表达量在ABA处理48 h后下降,在PEG处理下显著高于对照.综上认为,CoNAC5与CoNAC79其N端可能存在抑制区域,从而阻碍了全长序列的转录;油茶两个NAC基因可能通过ABA合成途径间接参与干旱胁迫响应过程;在胁迫持续发生时,CoNAC79还可能通过其他途径直接参与干旱胁迫响应过程.该研究结果为进一步探究NAC转录因子在油茶响应干旱胁迫过程中的作用提供了科学依据.
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关键词
克隆干旱胁迫亚细胞定位酵母自激活ABA途径cloningdrought stresssubcellular localizationyeast self-activationABA pathway
分类号
Q943（植物细胞遗传学）
栏目名称
DOI
10.11931/guihaia.gxzw202309004
发布时间
2025-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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