秋茄KoNAC25基因的克隆、亚细胞定位及表达分析
Cloning,subcellular localization and expression analysis of KoNAC25 gene in Kandelia obovata
摘要NAC转录因子在植物中广泛存在且为植物所特有,在调节植物生长发育、激素信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要作用.前期工作中,从红树植物秋茄(Kandelia obovata)基因组中鉴定到 1 个受低温诱导的NAC基因KoNAC25(GenBank登录号PP860407).为探究KoNAC25 基因是否参与秋茄盐胁迫响应,该研究通过 RT-PCR技术从秋茄叶片cDNA中克隆KoNAC25 基因,并对其进行序列特征、系统进化、亚细胞定位及基因表达分析.结果表明:(1)秋茄KoNAC25 基因的开放阅读框(ORF)全长为 858 bp,共编码285 个氨基酸,分子量为 32.9 kDa,理论等电点为 8.53.KoNAC25 为亲水性蛋白,不含信号肽且无跨膜结构.(2)序列同源比对显示,KoNAC25 蛋白N端具有 1 个NAM超家族结构域,由 5 个保守的亚结构域构成,属于NAM亚家族成员.(3)系统进化树表明,秋茄 KoNAC25 转录因子与大戟科的蓖麻(Ricinus communis)、木薯(Manihot esculenta)和橡胶树(Hevea brasiliensis)等植物亲缘关系较近.(4)亚细胞定位试验证实,KoNAC25 蛋白定位于细胞核.(5)qRT-PCR分析结果表明,KoNAC25 基因在叶中表达量显著高于花中,同时该基因能够被盐(NaCl)和脱落酸(ABA)诱导表达上调,分别在处理 12h和 6h时达到峰值.综上认为,KoNAC25 参与了秋茄盐胁迫响应的相关调控,该结果为进一步研究秋茄KoNAC25 基因在盐胁迫下的功能及其表达调控机理提供了参考.
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