换一批BMMYA’平板-Fast blue RR顶层琼脂法高效筛选高酶活脂肪酶
BMMYA' plate -Fast blue RR top agar —— an efficient plate screening method for lipase with high enzyme activity
摘要建立了一种高效筛选高酶活或高产脂肪酶菌株的平板方法.该方法以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)脂肪酶基因proRCL在毕赤酵母中构建的基因突变文库为筛选对象,利用BMMYA’平板-Fast blue RR顶层琼脂法对其中高酶活或高产的脂肪酶突变株进行筛选,将待筛菌株接种至含有2％甲醇的BMMYA’平板上,30℃生长并诱导4～5d后,平板经脂肪酶致死温度65℃处理1h,冰浴、室温平衡后,向平板中倾入Fast blue RR顶层琼脂.2 min内周围显示出明显的黑褐色的菌株为高酶活或高产突变株.该方法简便,快速,高效而且准确,筛选阳性率可达到90％.
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分类号
TQ460.38
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-6678.2012.01.005
发布时间
2012-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（20802027）
国家高技术研究发展计划（863计划）（2010AA101501,2008AA102304）
国家科技支撑计划（2008BAI63B07）
长江学者和创新团队发展计划（IRT0532）
中央高校基本科研业务费专项（JUSRP11014）
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