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乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因的克隆及表达

Cloning and expression of adh2 and aldh6

摘要利用表达载体pYES2表达乙醇脱氢酶2(Alcohol dehydrogenase 2,ADH2)和乙醛脱氢酶6(Acetaldehyde dehydrogenase 6,ALDH6),从而实现将乙醇直接转化为乙酸.以啤酒酵母总DNA为模板,通过PCR获得adh2基因和aldh6基因.分别构建表达载体pYES2-adh2、pYES2-aldh6和pY-ES2-aldh6-adh2,并电击导入宿主菌INVScl中.PCR测序结果上传GenBank获得登录号为JX901290、JX901291,与已公布序列相似性分别为96%和99%.重组菌扩大培养后移入到诱导培养基中,进行诱导表达.在含2%半乳糖诱导培养基诱导下4h酶活达到最高,ADH酶活为0.49U/mg,是原始菌株的2.7倍,ALDH酶活为0.11 U/mg,为原始菌株的2倍.

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