换一批不同来源的尿卟啉原Ⅲ转甲基酶在脱氮假单胞菌中的表达及其对生产维生素B12的影响
Over-expression uroporphyrinogen Ⅲ methyltransferase from different strains in Pseudomonas denitrificans and their effects on vitamin B12 production
摘要S-腺苷-L-甲硫氨酸依赖型尿卟啉原Ⅲ转甲基酶(S-adenosy-L-methionine uroprophyrinogen Ⅲ methyltransferase,SUMT)催化尿卟啉原Ⅲ(uroprophyrinogen Ⅲ,urogen Ⅲ)中心碳原子C-2和C-7甲基化生成前咕啉-2,是维生素B12生物合成途径中的一步关键酶.本文分别克隆了荚膜红细菌来源的RCcobA1,RCcobA2和脱氮假单胞菌来源的PDcobA,并在VB12生产菌株脱氮假单胞菌中过表达和发酵.通过对三株重组菌维生素B12发酵结果分析可知,SUMT(PDcobA),SUMT1(RCco-bA1)和SUMT2(RCcobA2)的表达有利于维生素B12产量的提高,与对照菌株相比分别提高了16.48％,10.2％和31.86％.根据摇瓶发酵的结果在5L发酵罐上进行了放大实验,pBBR122-Pbla-RCcobA2的产量为144.5 mg/L,相比对照菌pBBR122-Pb1a(111.3 mg/L)产量提高了29.83％左右.结论:SUMT的表达可以在一定程度上解除维生素B12合成途径中的瓶颈,提高维生素B12产量.
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关键词
维生素B12尿卟啉原Ⅲ转甲基酶尿卟啉原Ⅲ脱氮假单胞菌Vitamin B12uroporphyrinogen Ⅲ methyltransferaseuroprophyrinogen ⅡPseudomonas denitrificans
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DOI
10.3969/j.issn.1001-6678.2017.03.001
发布时间
2017-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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