换一批
换一批Burkholderia cepacia胆固醇酯酶及其分子伴侣基因的串联表达及酶学性质的研究
Tandem expression of Burkholderia cepacia cholesterol esterase gene and its molecular chaperone
摘要为实现胆固醇酯酶的可溶性表达,以Burkholderia cepacia ST-200胆固醇酯酶为研究对象,将酶及其分子伴侣通过人工添加的SD序列在大肠杆菌中进行串联表达.通过SDS-PAGE 电泳分析,胆固醇酯酶成功获得可溶性表达,摇瓶水平的总酶量为1 077 U/L.经过镍柱纯化之后可以获得一条相对分子量约为37 kDa的单一条带.利用圆二色谱解析胆固醇酯酶的二级结构,并测定Tm值,从最适温度、最适pH、热稳定性、pH稳定性及有机溶剂耐受性等方面对胆固醇酯酶进行研究,结果表明该酶在pH为7.0,45 ℃条件下表现出最大活力.
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关键词
胆固醇酯酶Burkholderiacepacia分子伴侣串联表达cholesterol esteraseBurkholderia cepaciamolecular chaperonetandem expression
栏目名称
研究与应用
DOI
10.3969/j.issn.1001-6678.2017.04.005
发布时间
2017-09-05
基金项目
江苏省优青
江苏省产学研
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