换一批
换一批摘要代谢组样品制备是代谢组学研究的基础.本文以维生素B12生产菌株苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti 320为研究对象,通过检测细胞损伤、ATP泄漏、代谢物回收效率以及细胞代谢淬灭效率综合评价细胞淬灭方法,同时对5种提取试剂的提取效率进行比较优化胞内代谢物的提取方法.最终获得苜蓿中华根瘤菌S.meliloti 320的胞内代谢组学样品制备较佳条件:即-20℃40％甲醇淬灭细胞,过滤收集淬灭细胞,甲醇/乙腈/水(体积比为2∶2∶2,外加0.1％的甲酸)与50％甲醇相结合提取胞内代谢物.实验结果显示-20℃的40％甲醇(通过过滤收集细胞)对细胞膜的损伤较小,且细胞代谢淬灭效率和回收效率较高;甲醇/乙腈/水(体积比为2∶2∶2,外加0.1％的甲酸)与50％的甲醇对胞内代谢物的提取效率较高且有互补作用.
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栏目名称
研究与应用
DOI
10.3969/j.issn.1001-6678.2019.04.001
发布时间
2019-10-24
基金项目
国家重点研发计划
国家自然科学基金
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