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大肠埃希菌DNA质控品的研制

Preparation of Quality Control of E.coil Cell DNA

摘要研制大肠埃希菌DNA残留量测定所用质控品.抽提大肠埃希菌基因组DNA作为质控品原料,通过紫外分光光度法和电泳进行纯度和含量测定,采用紫外分光光度法和定量PCR法检测其均匀性和稳定性,并评价其加标回收率.经检测,A260/A 280均在1.8~2.0之间,电泳图谱条带单一,无RNA和寡核苷酸存在.应用紫外分光光度法和定量PCR法对质控品进行均匀性和稳定性检测,统计结果表明,质控品均匀性良好;在-20℃的保存条件下,半年内未发现不稳定现象;在25℃的保存条件下,7 d内未发现不稳定现象.进行定量PCR法测定,在10-2~103 pg之间线性良好,标准曲线R值为0.997,斜率为-3.65,同时每组加标样品的回收率在70%~130%之间,SRSD≤20%.该批大肠杆菌DNA质控品各项指标均符合要求,可作为质控品用于定量PCR检测大肠埃希菌的DNA残留量,含量定为111.73 μg/mL.

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作者 夏雪 [1] 徐洁茹 [1] 王尚君 [1] 季红梅 [1] 黄蓓 [1] 燕茹 [1] 学术成果认领
作者单位 南京市计量监督检测院/国家生物技术药物产业计量测试中心,江苏南京 210000 [1]
栏目名称 研究与应用
DOI 10.3969/j.issn.1001-6678.2024.02.007
发布时间 2024-05-13
基金项目
南京市市场监督管理局科技项目 肿瘤标志基因核酸标准物质的研制
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工业微生物

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