换一批摘要本研究以公司自主构建的CHO-K1重组细胞株为对象,在3 L生物反应器中进行基础及补料培养基的筛选工作.应用Mintab19对降温温度、降温时间、接种密度三个因子进行全析因实验设计,同时对补料策略(补料时间及补料量)进行补充试验,然后以蛋白表达量为响应值进行模型分析,结合细胞生长曲线得到最优工艺参数,并通过3 L反应器进行工艺放大与验证.筛选后最优基础及补料培养基为:CD1005、CD1105a、CD1105b;筛选后最优工艺:接种密度为1.5×106 cells/mL,培养温度为37 ℃→35℃,降温时间为第4天,补料策略为第3、5、7、9、11、13天分别流加5％的补料培养基a和0.5％的补料培养基b.优化后蛋白表达量达5.16 g/L,较原工艺增长19％,细胞比生产速率较原工艺增长17％.本研究显著提高了细胞的蛋白表达量和比生产速率,为后续进一步扩大生产奠定了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1001-6678.2025.03.041
发布时间
2025-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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