换一批
换一批贵阳腐霉类枯草菌素蛋白酶基因的原核表达
The Prokaryotic Expression of A Subtilisin-like Protease (Pr1) Gene from Pythium guiyangense Su, A Fungal Pathogen of Mosquitoes
摘要目的:实现贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)类枯草菌素蛋白酶(subtilisin-like protease, Pr1)基因在大肠杆菌中的活性表达,验证已获得的基因序列(YP1977)是否属于subtilisin-like protease基因家族成员.方法:(1)提取贵阳腐霉总RNA,以已获得的序列(YP1977)为模版设计引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增Pr1基因ORF片段;(2)构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白基因ORF序列的重组质粒pTWIN1-Pr1-EGFP,转化表达菌株E.coli ER2566,IPTG诱导菌株表达Pr1蛋白酶.结果:成功构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白ORF序列的重组质粒pTWIN1-Pr1-EGFP,实现了Pr1基因在大肠杆菌中的活性表达.结论:证明已获得的DNA序列是贵阳腐霉的一个Pr1基因的编码区.
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主题词
基因(Genes)真菌(Fungi)蛋白(Egg White)逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction)灭蚊(Mosquito Control)
分类号
Q949.323.3Q936
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1000-2707.2008.03.004
发布时间
2008-09-09
基金项目
国家自然科学基金
贵州省科技攻关项目
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