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实时荧光定量PCR法检测糖尿病肾病大鼠肾脏中BMP-2与MGP

Detection of Bone Morphogenetic Protein-2 and Matrix Gla Protein Gene Expression in Kidney of Diabetic Nephropathy Rats with Real-Time PCR

摘要目的:检测糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏中骨形成蛋白2(BMP-2)和基质Gla蛋白(MGP)的基因表达量的变化规律,探讨其对糖尿病肾病的影响.方法:设对照组(N组)及糖尿病肾病组(DN组,STZ诱导的DN大鼠模型);采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)方法检测4、12、24周DN大鼠及正常大鼠肾脏中BMP-2及MGP的基因定量,茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积.结果:(1)DN组各时间点血糖及24h尿蛋白量均较N组显著增高(P<0.05),自第12周开始,DN组血肌酐、血磷较N组明显增高(P<0.05);(2)DN组4周时BMP-2 mRNA已有表达,随时间延长表达逐渐升高,24周最高(P<0.05);DN组MGP表达量4周最高,随时间延长逐渐降低,24周最低(P<0.05),而N组BMP-2和MGP mRNA各时间点表达量差异均无统计学意义;(3)茜素红染色DN组第4~12周时偶见肾内小动脉少许点状红色钙盐沉积,第24周时可见肾实质内小动脉及周围组织有较多红色点片状沉积,N组茜素红染色为阴性;(4)DN组BMP-2和MGP呈显著负相关(r=-0.494,P<0.01),BMP-2表达与尿蛋白、血肌酐、血磷(r=0.422,P<0.01;r=0.743,P<0.01 r =0.671,P<0.01)呈显著正相关,MGP表达与尿蛋白、血肌酐、血磷(r=-0.511,P<0.01;r=-0.490,P<0.01;r=-0.420,P<0.05)呈显著负相关.结论:DN大鼠肾内小动脉钙化前已有血管钙化标志物BMP-2和MGP的表达,随时间延长BMP-2基因表达量逐渐增多,MGP基因表达量逐渐减少,提示DN大鼠肾脏内BMP-2及MGP基因表达量的变化可能参与DN进展.

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