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白芨ISSR-PCR反应体系的建立及优化

Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Bletilla striata

摘要目的:建立并优化白芨ISSR-PCR反应体系,为白芨种质资源分子评价奠定技术基础.方法:应用单因素和正交试验研究ISSR-PCR反应体系中模板DNA、Mg2、引物、dNTP、BSA及Taq DNA聚合酶等6个主要成分对扩增结果的影响,优化出ISSR-PCR最佳反应体系.结果:优化后25 μL反应体系中含100 ng DNA模板、2.0 mmol/L Mg2+、2.5 μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTP浓度、3.75 g/L BSA及1.25 UTaq DNA聚合酶.结论:建立了适用于白芨的ISSR-PCR最佳反应体系.

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