高磷、高钙诱导人血管平滑肌细胞钙化的研究

Influence of High Phosphate and High Calcium on Calcification of Human Vascular Smooth Muscle Cells

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摘要目的：探讨高磷及高钙诱导血管平滑肌细胞发生钙化的分子机制。方法：以人血管平滑肌细胞（ VSMCs）为模型，采用不同钙磷浓度的培养基与细胞共培养12 d，将细胞分为正常钙、磷组（对照组）、高磷组、高钙组和高磷﹢高钙组，分别采用免疫印迹（ western-blot）技术、逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）技术检测人血管平滑肌细胞核心结合因子α1（Cbfα1）、骨钙素、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白质和mRNA的表达；高磷﹢高钙条件孵育下的细胞加入ZVAD-FMK干预后，再次采用western-blot技术检测Cbfα1、骨钙素蛋白质表达的情况。结果：试验组Cbfα1、骨钙素表达增强（ P=0.013；P=0.007），而肌成纤维细胞的特异性标志物α-SMA表达下降（P=0.009），对照组上述3个指标无明显变化（P=0.055、P=0.074、P=0.63）；加入ZVAD-FMK与高磷﹢高钙组细胞共培养后，Cbfα1、骨钙素蛋白质的表达受到明显抑制。结论：高磷或（和）高钙通过使血管平滑肌细胞转化为成骨样细胞而导致钙化的发生；ZVAD-FMK可以在一定程度上抑制这一病理生理进程，提示凋亡和成骨分化均参与了钙化过程。