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体外补救成熟法对人卵细胞印记基因DNA甲基化的影响

The Impact of in vitro Rescue-Maturation on DNA Methylation of Imprinted Genes in Human Oocytes

摘要目的:探讨体外补救成熟的人卵细胞印记基因H19和PEG1的DNA甲基化状态,初步评价卵细胞体外补救成熟的表观遗传学风险.方法:选择卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)助孕治疗的不孕症患者54例,长方案超排卵取卵术后收集240个未成熟MⅠ期卵细胞,经体外补救培养24h后,获得130个成熟MⅡ期卵细胞,采用结合重亚硫酸盐限制性酶分析法(COBRA)检测其中62个卵细胞H19基因和68个卵细胞PEG1基因的DNA甲基化状态.结果:23个卵细胞H19基因经bisulfite-PCR扩增成功,成功率37.0%(23/62),其中5个卵细胞(21.7%,5/23)出现H19异常高甲基化模式;30个卵细胞经bisulfite-PCR扩增成功,成功率44.1% (30/68),其中1个卵细胞(3.3%,1/30)出现PEG1异常低甲基化模式.结论:使用体外补救成熟卵细胞可能增加DNA甲基化缺陷的风险.

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