首页 > 贵州医科大学学报 > LncRNA MIAT在颅内动脉瘤患者血清中的表达及靶向调节miR-331-3p对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

LncRNA MIAT在颅内动脉瘤患者血清中的表达及靶向调节miR-331-3p对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

Expression of LncRNA MIAT in serum of patients with intracranial aneurysm and the impacts of targeted regulation of miR-331-3p on the proliferation and apoptosis of vascular smooth muscle cells

二维码有效期 120s

摘要目的分析长非编码RNA(LncRNA)心肌梗死相关转录物(MIAT)在颅内动脉瘤(IA)患者血清中的表达,探究其对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响及作用机制.方法数字减影血管造影诊断的IA患者15例为IA组,同期无IA家族史的健康参与者15例为对照组(C组),qRT-PCR检测两组受试者血清Ln-cRNA MIAT和miR-331-3p水平;体外培养的VSMCs分为空白对照组(BC组)、过表达LncRNA MIAT阴性对照组(oe-NC组)、过表达LncRNA组(oe-MIAT组)、过表达LncRNA+过表达miR-331-3p阴性对照组(oe-MIAT+miR-331-3p-NC组)及过表达LncRNA+过表达miR-331-3p组(oe-MIAT+miR-331-3p mimic组);采用qRT-PCR检测VSMCs中LncRNA MIAT、miR-331-3p表达,MST测定VSMCs 24、48、72 h时的细胞活力(OD值),EdU染色测定VSMCs增殖,AnnexinⅤ/7-AAD双染法测定VSMCs凋亡,Western blot分析VSMCs中Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3表达;双荧光素酶报告、RNA免疫共沉淀验证LncRNA MIAT、miR-331-3p靶向关系.结果与C组相比,IA组患者血清LncRNA MIAT相对表达量显著升高,血清miR-331-3p相对表达量显著降低(P<0.05);与BC组及oe-NC组相比,oe-MIAT组、oe-MIAT+miR-331-3p-NC组LncRNA MIAT相对表达量、凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax表达增高,miR-331-3p的相对表达量、24 h、48 h、72 h的OD值、EdU阳性细胞比例、Bcl-2蛋白表达均下降(P<0.05);oe-MIAT+miR-331-3p-mimic组与oe-MIAT+miR-331-3p-NC组、oe-MIAT组相比,凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax表达下降,miR-331-3p的相对表达量、24 h、48 h、72 h的OD值、EdU阳性细胞比例、Bcl-2蛋白水平均显著增高(P<0.05);双荧光素酶报告、RNA免疫共沉淀表明LncRNA MIAT和miR-331-3p之间存在负向调控.结论 LncRNA MIAT在IA患者血清中高表达,高表达的LncRNA MIAT可通过下调miR-331-3p表达诱导VSMCs过度凋亡、抑制VSMCs增殖,参与IA发生或进展.